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高效液相色谱法测定食品中纳他霉素的检测方法分析

文档作者：朱盈蕊李琦仵军红文档来源：郑州市食品药品检验所		点击数：	更新时间： 2025年06月27日
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114 食品安全导刊 2016年9月
Technology
科技
分析与检测
本文建立了一种检测食品中纳他
霉素的分析方法。样品采用甲醇超
声提取，流动相为甲醇：11%（体积
分数） 乙酸溶液， 流速为1.00 mL/
min，波长为305 nm，加标回收率为
97.6% ～ 104.2%，相对标准偏差小于6%，
该方法简单、快速，为纳他霉素的进
一步开发和利用提供依据。
纳他霉素是一种无臭、无味，低剂
量且安全性高的天然防腐剂，能显著抑
制酵母菌、霉菌真菌等，被广泛应用于
乳酪、果汁、肉制品和糕点等食品中。
我国《食品安全国家标准食品添加剂使
用标准》（GB2760-2014）规定了不同
食品中纳他霉素的使用限量。为更好地
保证此类食品安全，确保食品中防腐剂
的使用在有效的控制范围内，建立一种
快速、高效的检测方法十分必要。
目前，对纳他霉素的检测方法主
要有薄层层析法、分光光度法、加压
毛细管电色谱、高效液相色谱法和高
效液相色谱串联色谱法等。本文采用
高效液相色谱法检测糕点中纳他霉素
的含量，通过对前处理方法和色谱分
离条件的优化来达到检测限量低、灵
敏度高的目的。
试验部分
仪器与试剂
Agilent 1260 型液相色谱仪，配紫外
检测器，安捷伦科技有限公司；Techcomp
CT14RD高速台式冷冻离心机，天美（中国）
科学仪器有限公司；VORTEX-5 型涡旋混
合器，江苏海门其林贝尔仪器制造有限
公司；ME201E 电子天平，梅特勒- 托利
多仪器( 上海) 有限公司。
纳他霉素标准储备溶液： 精密
称取纳他霉素标准品（纯度＞ 99％
）0.010 0 g，用甲醇定容至100 mL，
浓度为100 µg/mL。
纳他霉素标准溶液：准确吸取标
准储备溶液1.00 mL 于100 mL 容量
瓶中，用甲醇定容至刻度，其浓度为
1 µg/mL。分别准确量取1 µg/mL
溶液0.25、0.50、1.25、2.50 mL 和
5.00 mL 于25 mL 容量瓶中，用甲醇定
容于刻度，作标准系列。
甲醇、乙酸为色谱纯，其余试剂
均为分析纯，试验用水为超纯水，样
品购自本地超市。
试验条件
C18 反相色谱柱（5µm，4.6×
250 mm）；流动相为甲醇∶ 11% 乙酸
溶液=50 ∶ 50；流速为1.00 mL/min，
波长为305 nm；进样量为10 µL。
样品处理
精确称取5.00 g 样品，置于50 mL
离心管中，加入30 mL 甲醇，于涡旋混
合器上混合均匀，超声提取30 min，
加水10 mL 混合均匀后置于离心机上
以10 000 r/min 离心10 min，上清液
过0.45 µm 滤膜，滤液待上液相色谱
测定。
结果与讨论
色谱条件的优化
纳他霉素难溶于大部分有机溶剂，
微溶于水，易溶于乙酸，试验选择甲
醇- 乙酸溶液为流动性，并对不同乙
酸浓度和比例进行讨论。由试验可得,
当甲醇和乙酸溶液比例为50 ∶ 50 时，
纳他霉素达到最大响应值；乙酸体积
分数为11% 时，纳他霉素的峰型最
佳。因此选择甲醇∶ 11% 乙酸溶液为
50 ∶ 50 的比例为流动性对纳他霉素进
行测定。
对纳他霉素标准系列浓度进行
测定，以纳他霉素质量浓度为横坐标，
相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线。结
果表明：纳他霉素质量浓度在0.01 ～
0.20 µg/mL， 与其峰面积呈线性
关系。回归方程为y=28.011 4c-
4.334 7e-2，线性相关系数为0.999 9。
将对照品逐步稀释， 当稀释至
0.02 µg/mL 以下时，纳他霉素峰高在
3 倍基线噪声以下，故0.02 µg/mL 为
其最低检出浓度；按测定方法计算，
定量检出限为0.04 mg/kg。
方法的回收率
在两种糕点空白样品中添加3 个
浓度水平的纳他霉素标准溶液，作加
标回收率实验，结果见表1。由表1
可知，纳他霉素在糕点中的加标回收
率为93.6% ～ 104.2%，相对标准偏差
为为＜ 6%。
表1　纳他霉素的回收率
样品
添加量
（µg）
平均检出
量（µg）
平均回
收率（%）
RSD
（%）
糕点1
0.4 0.4096 102.4
0.8 0.7811 97.6 3.1
1 1.0357 103.6
糕点2
0.4 0.3743 93.6
0.8 0.8145 101.8 5.6
1 1.0421 104.2
结论
本方法采用高效液相色谱法测定
纳他霉素含量，选取糕点为实验材
料，通过优化实验条件，得纳他霉素
质量浓度在为0.01 ～ 0.20 µg/mL 范
围，与其峰面积呈线性关系。最低检
出浓度为0.02 µg/mL，定量检出限为
0.04 mg/kg， 加标回收率为
93.6% ～ 104.2%，相对标准偏差＜ 6%。
该方法操作简单、快速，准确可靠，
为食品中纳他霉素的分析检测提供了
一定的参考依据。
存在问题及展望
纳他霉素对真菌类有明显的抑制
作用，对细菌和乳酸菌效果不大，若
专一使用纳他霉素无法达到预期效果，
因此与其他防腐剂协同使用应是未来
的重点研究方向。
纳他霉素作为一种天然防腐剂以
其安全、健康的特点而备受人们的关
注，我国的纳他霉素产业起步较晚，
产量较低，普及率不高。随着对其研
究的逐步深入以及生产技术的逐步提
高，会极大地推动纳他霉素的普及使
用，也能更好地发挥其防腐作用。
作者简介：朱盈蕊（1986-），女，
汉族，河南邓州人，郑州市食品药品
检验所，硕士研究生。研究方向：食
品安全与分析。
高效液相色谱法测定食品中纳他霉素的
检测方法分析
□ 朱盈蕊　李　琦　仵军红　郑州市食品药品检验所
食品安全导刊2016年9月下正文-2016091012.indd 114 2016/10/12 16:16:15

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