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PCR技术快速检测鉴定啤酒中的污染菌和破坏性菌

文档作者：李端文档来源：拜发分析系统销售(北京)有限公司		点击数：	更新时间： 2025年06月17日
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CcR技术快速检测鉴定
。啤酒中的污染菌和破坏性菌
群
曩．，．圣，夕
现代啤酒由单一菌种——酵母发
酵而成。但在整个啤酒酿造过程中．酿
造设备．空气、酿造用水等诸多因素都
有可能导致有害微生物进入麦汁或发
酵液中，如果这些有害微生物大量生长
繁殖．就会污染麦汁或啤酒。污染腐败
的细菌对啤酒的质量影响相当大，会造
成啤酒总酸升高．高级醇含量增多、啤
酒IZ!味不协调．有杂味或异味．啤酒黏
度增加．无菌滤膜堵塞、影响酵母正常
生长与发酵，轻者影响啤酒口味，重者
造成啤酒浑浊．沉淀．更严重的情况下
会影响啤酒的质量安全．给消费者和啤
酒厂家造成伤害和损失。目前对啤酒酿
造和饮用安全构成威胁的微生物主要
可分为3类：革兰氏阳性茵、革兰氏阴性
菌和野生酵母。
目前国内啤酒厂普遍采用传统的
培养基检测方法．该方法是在厌氧环境
下通过专项培养基(常用MRs．NBB培养
基)培养．检测对啤酒有严重危害的厌
氧菌和微好氧菌，需要5—7天甚至更长
的培养时间才能完成检测和鉴定．其结
果往往滞后于生产无法及时指导技术
人员对酿造过程中产生的污染菌进行监
34食品安全导刊2011年9月刊
控．尤其是原生啤酒和纯生啤酒的生产
中，对卫生要求更为严格。为提高微生
物污染的检测速度，建立一套经济、实
用、有效的微生物污染快速检测．鉴定、
监控、预防体系成了现代啤酒工业非常
迫切的课题之～。
PCR技术在微生物检测方面有其独
特的优点，可以同时定性检测和鉴定破
坏性菌．也能从根本上解决有害菌检测
问题。多年来．德国拜发R—Biopha rm公
司与德国知名啤酒企业合作．致力于将
PCR技术应用于啤酒有害菌鉴定的研究
中，开发了系列啤i酉ReaI-time PCR有
害菌检测遗剂枣．可以在2小时到3天时
间内快速检测和鉴定出啤酒中的污染
菌和破坏性菌，解决了传统方法检测周
期长、结果滞后于生产等问题．得到国
外多家大型啤酒企业的认可。该方法在
欧洲已被数家知名啤酒厂家普遍应用
于生产线上的实时采样检测、生啤快
速质控和品牌风味控制上，得到了很好
的反馈。
对于品牌啤酒而言，生产质量控制
固然重要，但曰益扩大的生产规模和跨
地域兼并带来的多地生产．也常常导致
口李端拜发分析系统销售(北京)有限公司
在不同的生产地和生产线上生产出的
品牌啤酒风味不一致，为品牌啤酒的品
牌维护和推广带来了很大的困扰。对
此，以啤酒酿造为传统的德国等欧洲国
家率先引进了德国拜发R—B Jopharm公司
I构GEN—IAL。啤酒多元筛查和鉴定检测
PCR方法，对生产线各监控点的微生物
情况进行实时检测和控制。
德国拜发R—Biopharm公司的GEN—
IAL”啤"酒Real—time多元筛查检测试剂
盒及GEN—IAL8啤酒破坏性茵特异性
检测试剂盒可在几小时之内完成对
主要微生物快速、可靠的检测：可以
检测出啤酒中所有相关的有害菌(如
Lactobacillus孚L酸菌．Pediococcus／J＼球菌
或Megasphaera巨型球菌)及酵母(包括
Saccharomyces diastaticus糖化酵母)：
适用于生产过程中的工艺质量控制及
成品在线控制．可以将生产损耗降到最
低，避免不合格产品召回，从而保护公
司品牌形象。
德国R—Biopharm公司的PCR产品适
用于啤酒及其他饮料产品中，并符合最
新标准中关于有害酵母菌及细菌的检
测要求．操作简单、快速。
万方数据
1．DNA提取
GEN—IAL。啤酒DNA提取试剂盒
分为啤酒磁性DNA检测试剂盒和
Simplex。Easy DNA快速提取试剂盒．前
者是通过磁性分离法分离出超纯DNA．
特别适用于含抑菌成分的样品；后者则
是在一个试管中实现快速简单的DNA热
提取．无污染，十分适合预增菌的啤酒
样品。
2．筛选
一个PCR反应即可区分出细菌和酵
母菌。GEN—IAL。real—tIme PCR啤酒筛
查试剂盒可检测和区分啤酒中的细菌
及酵母菌．一次反应即能检出5类菌种．
能够通过杂交探针(FRET．TaqManTM)
检测出乳酸杆菌、片球菌．巨球型菌属．
Pektinatus及酵母茵。预富集只要3个小
时．所有的有害菌即可直观显现出来。
如果样品包含其他微生物，也不需要进
行再次确认。该系歹IJGEN—IAL。啤酒筛查
试剂盒具有高灵敏度和高特异性的特
点．无假阴性．每个PCR反应混合过程
中均进行内部质控，UDG体系可避免假
阳性结果。可配合市场上各种real—tlme
PCR仪使用，实现自动化操作。
3．菌种确认
GEN—IAL。啤酒菌种确认试剂盒
可对啤酒污染物进行种特异性检测。
适用于单重、双重及多重PCR反应．
灵敏度高，特异性强。可提供基于
FRET．TaqMan⋯或Syb r Green技术基础
的各种细菌及酵母茵的GEN—IAL4啤酒
菌种确认试剂盒。GEN—IAL。啤酒菌种
确认试剂盒主要包括醋酸茵(AcetiC
acid bacte ria)DNA检测、短乳杆菌
(LactobaciIlus brevis)DNA检测、布氏
乳杆茵(LactobaciIlus buchneri)／类布
氏乳杆菌(Lactobacillus parabuchneri)
DNA检测、干酪乳酸杆茵(LactobaciIlus
casei)／类布氏乳杆菌(LactobaciIlUS
P a rab u chne ri)／鼠李糖乳酸杆菌
(LactobaciIlus rhamnosus)／玉米乳杆
菌(Lactobaci¨us zeae)DNA检测．丘
状乳杆菌(LactobaciIlus colIinoides)
／短乳杆菌(LactobaClIlus b revI S)
／林德奈氏乳酸杆菌(Lactobac⋯us
n d n e ri)DNA检测、丘状乳杆菌
(LactobaciIIus colIinoides)／类丘状
乳杆菌(LactobaciIlus paracollinoides)
DNA检测、棒状乳杆菌(LactobaciIlus
coryniformis)DNA检测、林德奈氏乳酸
杆菌(LactobaciIlus lindneri)DNA检测．
LactobaclIlUS pe rolens DNA检测。植
物乳杆菌(LactobaciIlus Planta rum)／
类植物乳杆菌(Lactobacillus parapl)／
戊糖乳杆菌(LactobaciIlus pentosus)
DNA检测、乳杆菌(L actObaclII u S
rO S Sl ae)DNA检测．酿酒巨球形菌
(MegasPhae ra ce revi Si ae)DNA
检测、嗜啤酒梳状菌(Pecti n at u S
Ce revi siiPhi u S)DNA检测、培克提
那塔司弗利辛吉丝茵(Pectl n at u s
f ri Si ngen si S)DNA检测，梳状菌属
(Pectinatus spp)DNA检测．有害片
球菌(Pediococcus damnosus)DNA检
测、梳状菌属(Pectinatus spp)／巨球
形菌属(Megasphaera spp．)DNA检测、
异常德克拉酵母(Dekkera anomala)
DNA检测，布鲁塞尔德克酵母(Dekkera
b ruxel lensiS)DNA检测，异常毕赤酵
母(Plchla anomala)DNA检测。糖化
酵母(Saccha romyces diastatiCUS)
DNA检测、膜醭毕赤氏酵母(PiChl a
memb ranaefaciens)DNA检测、底层发
酵酵母(Bottom fermented yeast)DNA
检测．上层发酵酵母(Top fermented
Ye a st)DNA检测。脂环酸芽孢杆菌
(AIicyclobaciIlus spp．)DNA检测。除
此之外．还可以针对啤酒企业要求专门
研发其所需检测的菌种检测试剂盒。
在国外．特别是欧洲和日本．PCR技
术应用在啤酒中有害菌的快速检测和
鉴定方面已经比较成熟．而在国内则应
用很少。在德国拜发R-Biopharm公司的
推广下．国内现有多家知名啤酒企业与
德国拜发R—BI。pharm公司共同建立啤
酒有害茵的快速检测方法。为更有效地
推广该检测方法．德国拜发R—Biopharm
公司还推出了Spa rtan DX-1 2便携式
DNA分析仪，该仪器可配合德国拜发
R-Biopha rm公司的有害茵检测试剂盒
使用．便于啤酒工厂检测人员操作．且
其价格仅为大型PCR仪的十分之一。
Spartan DX-1 2便携式DNA分析仪体积
小．使用简单方便，配备专用分析软件，
与大型real--time PcR相比可大大降低
企业检测成本、人员培训成本和实验室
场地成本。
为了更好地保证啤酒质量．现代啤
酒工业非常需要一种快速微生物检测
技术，以解决传统微生物检测结果大
大滞后于工艺生产的尴尬状况。PCR技
术应用于啤酒有害茵的鉴定，不仅快
速、准确．而且可以预测有害菌对啤酒
的腐败能力，及时为生产提供指导性
信息．具有巨大的推广价值。德国拜发
R-Biopharm公司愿与国内啤酒企业一同
努力．推动啤酒有害菌快速检测技术的
发展。鞲

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